血小板自身抗体的检测方法
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血小板减少性紫癜是一种较为常见的出血性疾病,1735年由Werlhof首次报道。然而,直到发现一些患有血小板减少的母亲常生出有短暂性血小板减少的婴儿时,才开始怀疑此类疾病的免疫原性。1951年,Harri—ton把自身免疫血小板减少症患者血浆输给几个健康自愿者(包括他本人),1~3h内血小板总数立即下降。自此标志性实验以后,对免疫介导的血小板减少性紫癜的理解发生了巨大变化,亦开始了对血小板自身抗原和血小板自身抗体致病性的研究。1994年,抗血小板抗体被认为是引起免疫介导的血小板减少性紫癜的主要原因。
这也就是为什么很多血液医院治疗血小板减少性紫癜的时候都做这个检查的原因,血小板抗体是一种个体特异性而不是种族特异性的免疫球蛋白,多数成人ITP的血小板抗体为IgG或与IgG相混合的IgA及IgM,而儿童或青年多为IgM。
有临床意义的常见血小板抗体有两类,一是针对血小板上HLA—I类抗原的HLA抗体;二是针对血小板上GP抗原的血小板特异性抗体。
1.同义词 血小板相关抗体。
2.致病作用 抗血小板抗体可引起血小板活化、破坏,导致血小板数目下降,出血倾向或血栓。其作用主要通过以下几个途径①补体介导途经:血小板能表达G。受体,Cl,受体结合C1q后,形成巴,—IgG-血小板复合体,受体传导信号,血小板活化;血小板—自身抗体复合物激活补体,C3,沉积在血小板上,通过形成C5b。膜攻击体,介导血小板溶解;另外,C3。可结合巨噬细胞上CR2受体,促使网状内皮系统吞噬血小板;②Fc受体介导途径:IgG类自身抗体可直接与血小板上的Fcy-RⅡ发生作用,激活血小板;抗体上特异的Fab段能将血小板连接至表达Fc受体的巨噬细胞上,促进血小板的破坏;③自身抗体也能抑制vonWil—lebrand因子与GPIb/Ⅸ复合物结合,阻断血小板与内皮细胞结合,从而阻止血管损伤部位血小板“塞”形成,引发出血。
3.检测方法 抗血小板抗体的检测方法很多,固相化血小板血清学试验、简易致敏红细胞血小板血清学试验、ELISA法、免疫荧光试验、免疫血小板单克隆抗体固相法、免疫凝集法、抗原捕获法以及PCR技术。
其中,免疫血小板单克隆抗体固相法是检测血小板特异抗体的一种常用方法①包被绵羊抗鼠IgG抗体;②标本准备:5%EDTA—Na:(1:9)抗凝静脉血,再制备血小板碎片溶液;③加样:标本一二抗一底物一终止液;④结果判断:在490nm波长读吸光度值。
4.临床意义 血小板自身抗体与AITP发病密切相关,检测抗血小板自身抗体可辅助该类疾病的诊断,如新生儿同种免疫型AITP,输血后TP,自身免疫性TP,急、慢性AITP,HIV,SLE相关的AITP等。
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这也就是为什么很多血液医院治疗血小板减少性紫癜的时候都做这个检查的原因,血小板抗体是一种个体特异性而不是种族特异性的免疫球蛋白,多数成人ITP的血小板抗体为IgG或与IgG相混合的IgA及IgM,而儿童或青年多为IgM。
有临床意义的常见血小板抗体有两类,一是针对血小板上HLA—I类抗原的HLA抗体;二是针对血小板上GP抗原的血小板特异性抗体。
1.同义词 血小板相关抗体。
2.致病作用 抗血小板抗体可引起血小板活化、破坏,导致血小板数目下降,出血倾向或血栓。其作用主要通过以下几个途径①补体介导途经:血小板能表达G。受体,Cl,受体结合C1q后,形成巴,—IgG-血小板复合体,受体传导信号,血小板活化;血小板—自身抗体复合物激活补体,C3,沉积在血小板上,通过形成C5b。膜攻击体,介导血小板溶解;另外,C3。可结合巨噬细胞上CR2受体,促使网状内皮系统吞噬血小板;②Fc受体介导途径:IgG类自身抗体可直接与血小板上的Fcy-RⅡ发生作用,激活血小板;抗体上特异的Fab段能将血小板连接至表达Fc受体的巨噬细胞上,促进血小板的破坏;③自身抗体也能抑制vonWil—lebrand因子与GPIb/Ⅸ复合物结合,阻断血小板与内皮细胞结合,从而阻止血管损伤部位血小板“塞”形成,引发出血。
3.检测方法 抗血小板抗体的检测方法很多,固相化血小板血清学试验、简易致敏红细胞血小板血清学试验、ELISA法、免疫荧光试验、免疫血小板单克隆抗体固相法、免疫凝集法、抗原捕获法以及PCR技术。
其中,免疫血小板单克隆抗体固相法是检测血小板特异抗体的一种常用方法①包被绵羊抗鼠IgG抗体;②标本准备:5%EDTA—Na:(1:9)抗凝静脉血,再制备血小板碎片溶液;③加样:标本一二抗一底物一终止液;④结果判断:在490nm波长读吸光度值。
4.临床意义 血小板自身抗体与AITP发病密切相关,检测抗血小板自身抗体可辅助该类疾病的诊断,如新生儿同种免疫型AITP,输血后TP,自身免疫性TP,急、慢性AITP,HIV,SLE相关的AITP等。




